卵白蛋白(OVA)酶聯免疫吸附測定試劑盒

卵白蛋白(OVA)酶聯免疫吸附測定試劑盒

酶聯免疫吸附測定法

1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法，即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 。ELISA已成為分析化學領域中的前沿課題 ，它是一種特殊的試劑分析方法，是在免疫酶技術( immunoenzymatic techniques ) 的基礎上發展起來的一種新型的免疫測定技術 。

中文名

酶聯免疫吸附測定法

外文名

Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA

別名

ELISA法

發現者

Van Weerman

原理

抗體與酶復合物結合顯色

卵白蛋白(OVA)酶聯免疫吸附測定試劑盒

ELISA試劑盒試驗的影響因素
ELISA試劑盒，即酶聯免疫法。ELISA法具有靈敏度高、特異性強、重復性好的特點，并具有操作簡便、無放射性危害的優點，因而多年來廣泛應用于各高校、醫院、血站和科研機構的實驗室中。

影響ELISA實驗的因素：
我們技術人員通過幾年的實驗觀察，認為影響ELISA實驗的因素有如下三方面：
一、試劑盒
1、抗原、抗體活性對效價的影響：主要是試劑中抗體（或抗原）的效價降低或失活，結果不易判斷。再有ELISA試劑盒靈敏度高，對雜質的反應靈敏度也高，實驗中空白對照OD值偏高或假陽性；
2、酶結合物濃度過高，也會導致OD值假性增高。
二、試驗儀器
1、加樣器是否經過校正，酶免測定血清用血量很少，如手工加樣器的性能不好，吸取樣品不，會使結果忽高忽低；
2、每次洗板前，應檢查洗板機針孔有無堵塞。
三、操作
1、檢測前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后使用，試劑用完及時放回冰箱冷藏，以免造成試驗結果假性降低；
2、加樣時注意勿觸及包被板底部，以免擦傷包被物使抗體（抗原）脫落而影響實驗結果的準確性；
3、洗滌不充分，會使結果假性增高，過分洗滌呈假陰性；
4、比色時應保持包被孔底部無異物、無水汽，特別是冬季板從37℃水浴箱取出時，底部留有水汽，應將板底擦干后進行比色，水汽或孔內氣泡也會使OD值升高；
5、抗原與抗體反應達到平衡，依賴于溫度與時間。溫度高于45℃易引起失活及標記物脫落，溫度低于4℃，影響反應速度。